1.Velja rétta frumulínu
Þegar þú velur viðeigandi frumulínu fyrir tilraunina þína, vinsamlegast íhuga eftirfarandi skilyrði:
a. Tegundir: Frumulínur sem ekki eru úr mönnum og fruma sem ekki eru frumar hafa venjulega færri takmarkanir á líföryggi, en á endanum mun tilraunin þín ákvarða hvort nota eigi rækt af tiltekinni tegund.
b.Eiginleikar: Hver er tilgangurinn með tilrauninni þinni?Til dæmis geta frumulínur úr lifur og nýrum hentað betur fyrir eiturhrifapróf.
c. Takmörkuð eða samfelld: Þó að velja úr takmarkaðri frumulínu gæti veitt þér fleiri möguleika til að tjá rétta virkni, er samfelldar frumulínur yfirleitt auðveldara að klóna og viðhalda.
d.Eðlilegt eða umbreytt: Umbreyttar frumulínur hafa venjulega meiri vaxtarhraða og meiri sáningarvirkni, eru samfelldar og þurfa minna sermi í ræktunarmiðlinum, en svipgerð þeirra hefur tekið varanlegum breytingum í gegnum erfðabreytingar.
e.Vaxtarskilyrði og eiginleikar: Hverjar eru kröfur þínar um vaxtarhraða, mettunarþéttleika, klónunarhagkvæmni og vaxtargetu fjöðrunar?Til dæmis, til að tjá raðbrigða prótein með mikilli uppskeru, gætir þú þurft að velja frumulínur sem hafa hraðan vaxtarhraða og getu til að vaxa í sviflausn.
f.Önnur skilyrði: Ef þú ert að nota takmarkaða frumulínu, er nóg af lager tiltækt?Er frumulínan að fullu einkennd, eða þarftu að sannreyna það sjálfur?Ef þú ert að nota óeðlilega frumulínu, er þá samsvarandi eðlileg frumulína sem hægt er að nota sem stjórn?Er frumulínan stöðug?Ef ekki, hversu auðvelt er það að klóna það og búa til nóg af frosnum stofni fyrir tilraunina þína?
2. Fáðu frumulínur
Þú getur byggt upp þína eigin ræktun úr frumfrumum, eða þú getur valið að kaupa rótgrónar frumuræktanir frá birgjum í atvinnuskyni eða sem ekki eru rekin í hagnaðarskyni (þ.e. frumubönkum).Virtir birgjar veita hágæða frumulínur sem hafa verið vandlega prófaðar með tilliti til heilleika og tryggja að ræktunin sé laus við aðskotaefni.Við mælum með því að fá ekki ræktun að láni frá öðrum rannsóknarstofum vegna þess að þær eru í mikilli hættu á frumumengun.Óháð uppruna þess, vinsamlegast vertu viss um að allar nýjar frumulínur hafi verið prófaðar fyrir mycoplasma-mengun áður en þú byrjar að nota það.
Pósttími: Feb-01-2023