1.Hvað er frumuræktun?
Með frumurækt er átt við að fjarlægja frumur úr dýrum eða plöntum og rækta þær síðan í hagstæðu gerviumhverfi.Hægt er að taka frumurnar beint úr vefnum og brjóta þær niður með ensím- eða vélrænum aðferðum áður en þær eru ræktaðar, eða þær geta verið fengnar úr þekktum frumulínum eða frumulínum.
2.Hvað er frummenning?
Frumræktun vísar til ræktunarstigsins eftir að frumur eru aðskildar frá vefnum og fjölga sér við viðeigandi aðstæður þar til þær taka upp allt tiltækt hvarfefni (þ.e. ná samruna).Á þessu stigi verður að undirrækta frumurnar með því að flytja þær í nýtt ílát með ferskum vaxtarmiðli til að gefa meira pláss fyrir áframhaldandi vöxt.
2.1 Farlína
Eftir fyrstu undirræktina er frumræktin kölluð frumulína eða undirklón.Frumulínur úr frumræktun hafa takmarkaðan líftíma (þ.e. takmarkaðan líftíma; sjá hér að neðan) og þegar þær fara framhjá eru frumurnar með mesta vaxtargetu ráðandi, sem leiðir til ákveðins arfgerðar í þýðinu sem er með svipgerð.
2.2 Frumustofn
Ef undirhópur frumulínu er jákvætt valinn úr ræktuninni með klónun eða annarri aðferð, myndi frumulínan verða frumustofn.Frumustofnar fá venjulega viðbótarerfðafræðilegar breytingar eftir að foreldralínan byrjar.
3.Takmarkaðar og samfelldar frumulínur
Venjulegar frumur skipta sér venjulega aðeins í takmarkaðan fjölda sinnum áður en þær missa getu til að fjölga sér.Þetta er erfðafræðilega ákvarðaður atburður sem kallast öldrun;þessar frumulínur eru kallaðar endanlegar frumulínur.Hins vegar verða sumar frumulínur ódauðlegar í gegnum ferli sem kallast umbreyting, sem getur átt sér stað af sjálfu sér eða getur verið framkallað af efnum eða vírusum.Þegar takmörkuð frumulína gengur í gegnum umbreytingu og öðlast getu til að skipta sér endalaust verður hún að samfelldri frumulínu.
4.Menningarástand
Ræktunaraðstæður hverrar frumutegundar eru mjög mismunandi, en gervi umhverfið til að rækta frumur er alltaf samsett úr hentugum íláti sem inniheldur eftirfarandi:
4.1 Undirlag eða ræktunarefni sem gefur nauðsynleg næringarefni (amínósýrur, kolvetni, vítamín, steinefni)
4.2 Vaxtarþættir
4.3 Hormón
4.4 Lofttegundir (O2, CO2)
4.5 Stýrt eðlis- og efnaumhverfi (pH, osmótískur þrýstingur, hitastig)
Flestar frumur eru festingarháðar og verða að vera ræktaðar á föstu eða hálfföstu undirlagi (viðloðandi eða einlaga ræktun), á meðan aðrar frumur geta vaxið fljótandi í miðlinum (svifræktun).
5.Kryopvarðveisla
Ef umframfrumur eru í undirræktinni skal meðhöndla þær með viðeigandi hlífðarefni (svo sem DMSO eða glýseróli) og geyma þær við hitastig undir -130°C (frystingu) þar til þeirra er þörf.Fyrir frekari upplýsingar um undirræktun og frostvörn frumna.
6. Formgerð frumna í ræktun
Frum í ræktun má skipta í þrjá grunnflokka eftir lögun þeirra og útliti (þ.e. formgerð).
6.1 Fibroblast frumur eru tvískauta eða fjölskauta, hafa ílanga lögun og festast við undirlagið.
6.2 Þekjulaga frumur eru marghyrndar, hafa reglulegri stærð og eru festar við fylkið í aðskildum blöðum.
6.3 Eitilfrumulíkar frumur eru kúlulaga og vaxa venjulega í sviflausn án þess að festast við yfirborðið.
7.Umsókn frumuræktar
Frumuræktun er eitt helsta tækið sem notað er í frumu- og sameindalíffræði.Það veitir frábært líkankerfi til að rannsaka eðlilega lífeðlisfræði og lífefnafræði frumna (svo sem efnaskiptarannsóknir, öldrun), áhrif lyfja og eitruðra efnasambanda á frumur og stökkbreytingar og krabbameinsvaldandi áhrif.Það er einnig notað fyrir lyfjaskimun og þróun og stórframleiðslu á líffræðilegum efnasamböndum (svo sem bóluefni, lækningaprótein).Helsti kosturinn við að nota frumurækt fyrir eitthvað af þessum forritum er samkvæmni og endurgerðanleiki niðurstaðna sem hægt er að fá með því að nota lotu af klónuðum frumum.
Pósttími: Júní-03-2019